使用光学显微镜
使用光学显微镜聚焦时,先用低倍物镜,用粗准焦螺旋大致对焦,再用细准焦螺旋使图像清晰,然后才切换到较高倍数。
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显微镜的主要部件
- 目镜,最靠近眼睛的镜片,放大倍数通常为5倍或10倍。
- 物镜,安装在可旋转转换器上的一组镜片,通常包括低倍(10倍)、中倍(40倍)和高倍(100倍)。
- 载物台,放置载玻片的平台,用压片夹固定。
- 光圈,控制从下方光源穿过标本的光量。
- 粗准焦螺旋,大幅度移动载物台或镜筒,使标本大致对焦。
- 细准焦螺旋,小幅度移动载物台或镜筒,使图像更加清晰。
- 镜筒与底座,镜筒连接目镜与物镜,底座支撑整台显微镜。
标本对焦的步骤
- 将制好的载玻片放在载物台上并用压片夹固定,使标本对准载物台上的孔。
- 旋转转换器,使低倍物镜正对标本上方。
- 从侧面观察,使用粗准焦螺旋将物镜降低至接近载玻片但不接触。
- 透过目镜观察,缓慢转动粗准焦螺旋升高镜筒,直到大致看到标本。
- 使用细准焦螺旋使标本清晰对焦。
- 如有需要,调节光圈使标本照明清晰但不过亮。
从低倍转到高倍
标本应先在低倍下对焦,因为低倍视野较广,更容易找到标本。当标本居中并对焦后,旋转转换器换到下一个更高倍数的物镜。
由于大多数显微镜是同焦的,标本应大致仍处于对焦状态,因此只需使用细准焦螺旋重新使图像清晰即可。高倍下不应使用粗准焦螺旋,因为它可能使镜头移入载玻片而将其压碎。
放大倍数与图像尺寸的计算
标本的总放大倍数等于目镜的放大倍数乘以所用物镜的放大倍数。例如,10倍目镜配40倍物镜,总放大倍数为400倍。
要求出某结构的实际大小,先量出它在图像中的尺寸,再除以放大倍数:实际大小 = 图像大小 ÷ 放大倍数。若某细胞在400倍下所作的图中横宽为40 mm,其实际宽度为40 ÷ 400 = 0.1 mm,即100微米。
相除前须使图像大小与实际大小采用相同的单位。
使用显微镜时的安全事项
- 搬运显微镜时一只手托住底座,一只手握住镜臂,并轻轻放在平整的台面上。
- 拿取载玻片和盖玻片时握住边缘,因为它们很薄、易碎;一旦有玻璃破碎立即清理。
- 小心使用灯或反光镜以及电源线,因为灯会发热,电器部分应保持干燥。
- 只用擦镜纸清洁镜片,不要用手指或普通布,以免刮伤镜片。
试卷三风格题目
题目1,操作。一名学生透过目镜观察时找不到标本。
请提出定位并对焦的正确步骤顺序。
参考答案。先使用低倍物镜。
从侧面观察,用粗准焦螺旋使镜头接近载玻片。然后透过目镜观察,转动粗准焦螺旋使镜头远离,直到标本出现,最后用细准焦螺旋使图像清晰,再换到更高倍数。
题目2,计算。用10倍目镜和40倍物镜观察某标本。
说出总放大倍数,并计算一个看起来长20 mm的细胞的实际长度。
参考答案。总放大倍数 = 10 × 40 = 400倍。
实际长度 = 图像长度 ÷ 放大倍数 = 20 ÷ 400 = 0.05 mm,即50微米。
题目3,推断。学生换到高倍时,视野变暗且显示的细胞变少。
请解释这两个现象。
参考答案。高倍下视野较小,因此看到的细胞较少,但每个细胞显得更大。
视野变暗是因为高倍镜头覆盖的范围较小、透过的光较少,所以应把光圈开得更大以使图像变亮。
常见错误
来源:SRC-DSKP-EN
常见问题
为什么对焦时必须先使用低倍物镜?
粗准焦螺旋和细准焦螺旋有什么区别?
为什么高倍下不应使用粗准焦螺旋?
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