试卷为双语(马来文/英文);课程以英语授课。

制作临时装片(湿装片法)

临时装片的制作方法是将薄标本放在载玻片上的一滴水或染液中,再以一定角度缓慢放下盖玻片,避免困住气泡。

什么是湿装片

湿装片是一种临时装片,做法是将薄标本放在载玻片上的一滴液体中,再用盖玻片覆盖。它用于在光学显微镜下观察细胞,例如洋葱表皮细胞或人的口腔颊细胞。

之所以称为临时装片,是因为标本在短时间后会干涸或变质,装片无法长期保存。

目的

制作植物细胞(如洋葱表皮)和动物细胞(如人的口腔颊细胞)的临时湿装片,并在光学显微镜下观察,运用处理仪器、处理标本和绘制标本等操作技能。

材料与仪器

  • 洁净的载玻片和盖玻片
  • 滴管和蒸馏水
  • 镊子和装片针
  • 用于切取薄片的手术刀或新刀片
  • 碘液(用于植物细胞)和亚甲基蓝(用于动物细胞)
  • 标本,如一小块洋葱或用于取颊细胞的洁净棉签
  • 滤纸或纸巾
  • 光学显微镜

方法

  1. 用软布清洁载玻片和盖玻片,去除灰尘或油污。
  2. 用滴管在载玻片中央滴一到两滴水。
  3. 用镊子将标本的薄切片或薄膜放入水滴中,并使其平铺展开。
  4. 在标本边缘滴加一滴染液,例如植物细胞用碘液,动物细胞用亚甲基蓝。
  5. 将盖玻片以约45度角倾斜,一边先接触载玻片上靠近标本的位置,再用装片针缓慢平稳地将其放下。
  6. 用滤纸或纸巾吸去盖玻片边缘多余的液体。

为什么要染色及倾斜放下盖玻片

许多细胞结构,例如细胞核和细胞质,几乎无色,在显微镜下很难看清。染液能增添颜色和对比度,使细胞核等结构更加突出。

以倾斜角度放下盖玻片,而不是直接平放,可让空气在盖玻片下沉时从一侧被挤出,从而防止盖玻片与载玻片之间困住气泡。

预期观察结果

制作正确的装片会呈现清晰、光照均匀的视野,细胞铺成单层且没有困住气泡。染色后,每个细胞的细胞核在颜色较浅的细胞质衬托下清晰突出。

植物细胞与动物细胞临时装片的典型观察结果。
标本与染液应能看到的结构
洋葱表皮,碘液呈砖块状排列的长方形细胞,各有细胞壁、细胞质和被染色的细胞核;无叶绿体
人口腔颊细胞,亚甲基蓝圆形、不规则的细胞,无细胞壁,有薄的细胞膜、细胞质和被染色的细胞核
水中的苔藓叶或黑藻叶细胞具有清晰的细胞壁和绿色的叶绿体

结论

将薄而铺展良好的标本置于染液中并在不困住气泡的情况下盖好,可得到能辨认单个细胞及其细胞核的视野。比较两种标本可看出植物细胞与动物细胞的主要区别:植物细胞因有细胞壁而具有固定的长方形形状,而动物细胞没有细胞壁,呈不规则的圆形。

试卷三风格问题

情境。一名学生制作了用碘液染色的洋葱表皮细胞临时装片,并在光学显微镜下观察。

问题1(观察与推论)。说出对洋葱细胞的一项观察,并由此作出一项推论。

参考答案。观察:细胞呈长方形,彼此紧密排列,每个细胞周围有清晰的边界。

推论:植物细胞具有细胞壁,使其具有固定而规则的形状。

问题2(记录绘图)。说明如何为这些细胞绘制一幅良好的带标签生物图。

参考答案。使用削尖的铅笔,画出清晰连续的线条,不加阴影

画出几个有代表性、大到足以看清的细胞,然后用不交叉的直的标签线标注细胞壁、细胞质和细胞核,并加上标题和放大倍数。

问题3(列表)。设计一个表格来比较洋葱细胞与颊细胞。

参考答案。画一个表格,第一列为特征(细胞壁、整体形状、细胞核、叶绿体),另两列分别标题为洋葱细胞颊细胞,然后为每个特征填入有或无以及形状。

问题4(由错误作推论)。在显微镜下,学生在细胞之间看到边缘粗黑的深色圆形轮廓。

解释这些是什么以及如何避免。

参考答案。它们是困在盖玻片下的气泡,并非细胞。

可通过以一定角度缓慢放下盖玻片来避免,使空气从一侧被挤出而不被困住。

安全事项

  • 载玻片和盖玻片薄而易碎,应握住边缘,并将任何碎玻璃放入利器或碎玻璃收集容器中。
  • 用于切取薄片的手术刀或刀片非常锋利;应在瓷砖上操作,刀口远离手指。
  • 碘液和亚甲基蓝会沾染皮肤和衣物,且为轻度刺激物,应避免接触并冲洗掉任何溅到的液体。
  • 取自己的颊细胞时使用洁净的棉签,不要与他人共用,并按指示处置;事后洗手。

常见错误

来源:SRC-DSKP-EN

常见问题

为什么盖玻片要以角度放下而不是直接平放?
以角度放下盖玻片可让被困的空气在其沉降到液滴上时从一侧被挤出,防止盖玻片下方形成气泡。气泡在显微镜下呈深色圆形轮廓,可能被误认为细胞,或遮挡对标本的观察。
为什么临时装片要加染液?
许多细胞结构本身无色或颜色极浅,在背景中难以看清。碘液或亚甲基蓝等染液能为细胞核等结构增添颜色,提高对比度,使其在显微镜下更容易辨认。
为什么这种装片称为“临时”装片?
因为标本是安置在水或水基染液中的,这些液体会随时间蒸发。液体干涸后,标本会收缩、干燥或变质,因此装片无法保存并在短时间后再次观察。

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