制作临时装片(湿装片法)
临时装片的制作方法是将薄标本放在载玻片上的一滴水或染液中,再以一定角度缓慢放下盖玻片,避免困住气泡。
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什么是湿装片
湿装片是一种临时装片,做法是将薄标本放在载玻片上的一滴液体中,再用盖玻片覆盖。它用于在光学显微镜下观察细胞,例如洋葱表皮细胞或人的口腔颊细胞。
之所以称为临时装片,是因为标本在短时间后会干涸或变质,装片无法长期保存。
目的
制作植物细胞(如洋葱表皮)和动物细胞(如人的口腔颊细胞)的临时湿装片,并在光学显微镜下观察,运用处理仪器、处理标本和绘制标本等操作技能。
材料与仪器
- 洁净的载玻片和盖玻片
- 滴管和蒸馏水
- 镊子和装片针
- 用于切取薄片的手术刀或新刀片
- 碘液(用于植物细胞)和亚甲基蓝(用于动物细胞)
- 标本,如一小块洋葱或用于取颊细胞的洁净棉签
- 滤纸或纸巾
- 光学显微镜
方法
- 用软布清洁载玻片和盖玻片,去除灰尘或油污。
- 用滴管在载玻片中央滴一到两滴水。
- 用镊子将标本的薄切片或薄膜放入水滴中,并使其平铺展开。
- 在标本边缘滴加一滴染液,例如植物细胞用碘液,动物细胞用亚甲基蓝。
- 将盖玻片以约45度角倾斜,一边先接触载玻片上靠近标本的位置,再用装片针缓慢平稳地将其放下。
- 用滤纸或纸巾吸去盖玻片边缘多余的液体。
为什么要染色及倾斜放下盖玻片
许多细胞结构,例如细胞核和细胞质,几乎无色,在显微镜下很难看清。染液能增添颜色和对比度,使细胞核等结构更加突出。
以倾斜角度放下盖玻片,而不是直接平放,可让空气在盖玻片下沉时从一侧被挤出,从而防止盖玻片与载玻片之间困住气泡。
预期观察结果
制作正确的装片会呈现清晰、光照均匀的视野,细胞铺成单层且没有困住气泡。染色后,每个细胞的细胞核在颜色较浅的细胞质衬托下清晰突出。
| 标本与染液 | 应能看到的结构 |
|---|---|
| 洋葱表皮,碘液 | 呈砖块状排列的长方形细胞,各有细胞壁、细胞质和被染色的细胞核;无叶绿体 |
| 人口腔颊细胞,亚甲基蓝 | 圆形、不规则的细胞,无细胞壁,有薄的细胞膜、细胞质和被染色的细胞核 |
| 水中的苔藓叶或黑藻叶 | 细胞具有清晰的细胞壁和绿色的叶绿体 |
结论
将薄而铺展良好的标本置于染液中并在不困住气泡的情况下盖好,可得到能辨认单个细胞及其细胞核的视野。比较两种标本可看出植物细胞与动物细胞的主要区别:植物细胞因有细胞壁而具有固定的长方形形状,而动物细胞没有细胞壁,呈不规则的圆形。
试卷三风格问题
情境。一名学生制作了用碘液染色的洋葱表皮细胞临时装片,并在光学显微镜下观察。
问题1(观察与推论)。说出对洋葱细胞的一项观察,并由此作出一项推论。
参考答案。观察:细胞呈长方形,彼此紧密排列,每个细胞周围有清晰的边界。
推论:植物细胞具有细胞壁,使其具有固定而规则的形状。
问题2(记录绘图)。说明如何为这些细胞绘制一幅良好的带标签生物图。
参考答案。使用削尖的铅笔,画出清晰连续的线条,不加阴影。
画出几个有代表性、大到足以看清的细胞,然后用不交叉的直的标签线标注细胞壁、细胞质和细胞核,并加上标题和放大倍数。
问题3(列表)。设计一个表格来比较洋葱细胞与颊细胞。
参考答案。画一个表格,第一列为特征(细胞壁、整体形状、细胞核、叶绿体),另两列分别标题为洋葱细胞和颊细胞,然后为每个特征填入有或无以及形状。
问题4(由错误作推论)。在显微镜下,学生在细胞之间看到边缘粗黑的深色圆形轮廓。
解释这些是什么以及如何避免。
参考答案。它们是困在盖玻片下的气泡,并非细胞。
可通过以一定角度缓慢放下盖玻片来避免,使空气从一侧被挤出而不被困住。
安全事项
- 载玻片和盖玻片薄而易碎,应握住边缘,并将任何碎玻璃放入利器或碎玻璃收集容器中。
- 用于切取薄片的手术刀或刀片非常锋利;应在瓷砖上操作,刀口远离手指。
- 碘液和亚甲基蓝会沾染皮肤和衣物,且为轻度刺激物,应避免接触并冲洗掉任何溅到的液体。
- 取自己的颊细胞时使用洁净的棉签,不要与他人共用,并按指示处置;事后洗手。
常见错误
来源:SRC-DSKP-EN
常见问题
为什么盖玻片要以角度放下而不是直接平放?
为什么临时装片要加染液?
为什么这种装片称为“临时”装片?
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