试卷为双语(马来文/英文);课程以英语授课。

酶的作用

酶是一种生物催化剂,通过在活性部位与特定底物结合形成酶-底物复合物来加快反应速率,随后释放产物,自身保持不变并可再次参与反应。

发生的部位

酶的作用发生在酶的活性部位,一个具有特定形状、只有相配的底物才能嵌入的区域。酶既在细胞内起作用,例如在呼吸作用中,也在细胞外起作用,例如消化道中的消化酶。

细胞内酶在细胞质与细胞器内起作用:糖酵解的酶在细胞质中,三羧酸循环的酶在线粒体基质中,光合作用的酶在叶绿体基质中。细胞外酶在细胞内合成,由高尔基体包装成囊泡,经胞吐作用释放到细胞外发挥作用,口腔中的唾液淀粉酶、胃中的胃蛋白酶,以及十二指肠中的胰脂肪酶、胰淀粉酶与胰蛋白酶。

作用部位对考试答案很重要,因为每个部位都有各自的最适pH:胃蛋白酶在酸性的胃中约pH 2下工作,胰蛋白酶在碱性的十二指肠中约pH 8下工作。

输入与输出

  • 输入:底物,酶所作用的分子,例如淀粉酶的底物是淀粉,胃蛋白酶的底物是蛋白质,过氧化氢酶的底物是过氧化氢。
  • 输入:酶,一种球状蛋白质,其活性部位由少数几个氨基酸折叠而成,形状精确。
  • 输入:合适的条件,接近最适温度、接近最适pH,以及水解反应所需的水。
  • 输出:产物,淀粉生成麦芽糖,蛋白质生成多肽,过氧化氢生成水和氧气。
  • 输出:酶本身,保持不变地被释放,并能立即与另一个底物分子结合。
  • 不属于输出:通常意义上的能量,酶降低反应的活化能,使反应在体温下更快进行,但酶并不提供能量。

步骤

  1. 随机运动使底物分子靠近酶;底物浓度和温度越高,碰撞越频繁。
  2. 底物因形状互补而嵌入活性部位,就像钥匙插入锁孔;形状不对的底物无法结合。
  3. 底物与活性部位之间形成弱键,把底物固定在位置上,并使其内部的化学键受到拉扯。
  4. 酶-底物复合物形成;反应所需的活化能已被降低。
  5. 反应发生:在分解反应中底物裂解为两种或更多产物,在合成反应中两个底物被连接起来。
  6. 产物的形状与底物不同,不再与活性部位相配,于是被释放。
  7. 酶的形状和化学组成保持不变;活性部位空出,准备接纳下一个底物分子。
  8. 这一循环每秒重复数千次,直到底物耗尽、产物被移走或条件发生改变。

为何重要以及如何受控

酶能加快那些原本进行得太慢、不足以维持生命的反应,而自身不会被消耗。由于每个活性部位形状特定,酶具有专一性,通常只对一种底物起作用。

酶的活性受温度、pH 与底物浓度影响,极端的温度或 pH 会改变活性部位的形状,使酶变性。

温度以两种相反的方式控制酶的作用。温度向最适温度(人体酶约为37 °C)上升时,分子获得动能,碰撞更频繁,反应速率提高。

超过最适温度后,振动破坏维持蛋白质折叠形状的弱氢键,活性部位失去特定形状,底物无法再结合:酶发生变性,且是永久性的。低温不会使酶变性,只会减慢反应,这就是为什么冷却过的试管重新加温后酶能恢复活性。

pH通过活性部位氨基酸所带的电荷来控制酶的作用。每种酶都有一个最适pH,在此pH下这些电荷维持正确的形状;偏离它会降低活性,极端改变则使酶变性。

底物浓度在一定范围内控制速率:底物越多,碰撞越多,速率越快,直到每个活性部位始终被占据、酶达到饱和,此后再增加底物也不会有差别。酶浓度从另一侧产生同样的效果,酶分子越多,可用的活性部位越多,只要底物充足,速率就会上升。

影响酶促反应速率的因素

教学大纲要求你解释并绘制成图的四个因素。
因素对速率的影响解释图形形状
温度上升至最适温度后急剧下降最适温度以下动能与碰撞增多;超过后活性部位变性最适温度处为峰值,随后陡降
pH最适pH处最高,两侧较低活性部位电荷改变,形状随之改变;极端pH使酶变性以最适pH为中心的对称峰
底物浓度上升后趋于平缓碰撞增多,直到所有活性部位被占据(饱和)逐渐变平进入平台的曲线
酶浓度成比例上升可供底物使用的活性部位增多底物过量时为直线

如何考查

题目可能要求用标注图描述锁钥模型,解释温度或 pH 变化如何影响酶催化反应的速率,或解释变性的含义以及变性后的酶为何无法发挥作用。

图表题最为常见:给出反应速率随温度或pH变化的曲线,要求描述并解释其形状。评分标准把描述(速率上升至37 °C后下降)与解释(动能与碰撞增多;超过最适温度后活性部位变性)分开计分,因此两者都要写。

第二类题给出实验装置,淀粉与淀粉酶按固定间隔做碘液检验,或用马铃薯中的过氧化氢酶分解过氧化氢并测量产生的氧气,要求你指出变量、预测结果并加以解释。比较题可能对比锁钥模型与诱导契合模型,或问为什么一种酶不能消化另一种底物。

常见误解

考试风格例题

题目。 一名学生把等体积的淀粉溶液与淀粉酶溶液放入试管,分别置于10 °C、25 °C、37 °C、50 °C和70 °C的水浴中。

每隔一分钟从各试管取一滴用碘液检验。碘液不再变蓝黑色所需的时间分别记录为18、9、4、12分钟以及“30分钟后仍无变化”。

(a) 解释碘液检验结果说明了什么。(b) 解释为什么37 °C时反应最快。

(c) 解释70 °C时的结果。(d) 学生随后把70 °C的试管冷却到37 °C再次检验。

预测结果并解释你的预测。

参考答案。 (a) 碘液遇淀粉变蓝黑色;当它保持棕色时,说明淀粉已被淀粉酶完全水解为麦芽糖,因此所需时间反映了酶作用的速率

(b) 37 °C是淀粉酶的最适温度:分子动能高,底物与活性部位之间的碰撞频繁,酶-底物复合物迅速形成。(c) 70 °C时酶已变性:高温破坏维持蛋白质形状的化学键,活性部位形状改变,底物不再能嵌入,淀粉未被分解,碘液保持蓝黑色。

(d) 碘液仍会变蓝黑色。变性是永久性的;冷却不能恢复活性部位的形状,因此没有淀粉被消化。

相比之下,10 °C的试管反应慢但酶未变性,因为低温只是降低了动能。

来源:SRC-DSKP-EN

常见问题

什么是锁钥模型?
锁钥模型说明酶的活性部位具有特定形状,如同锁;只有形状互补的底物,如同钥匙,才能嵌入其中。这就是为什么每种酶都具有专一性,通常只对一种底物起作用。
酶变性时会发生什么?
当极端高温或极端 pH 永久改变酶活性部位的形状时,就会发生变性,使底物不再能够嵌入。变性后的酶无法再催化其反应,即使条件恢复正常也是如此。
锁钥模型和诱导契合模型有什么区别?
锁钥模型认为活性部位是一个刚性形状,在结合前就与底物完全匹配。诱导契合模型认为活性部位略有弹性:底物进入时它会改变形状,贴合包裹底物,从而拉扯底物的化学键,帮助反应进行。诱导契合模型对酶作用的解释更完整,但教学大纲要求你描述的是锁钥模型。
为什么加入更多底物后速率会趋于平缓?
底物浓度低时,活性部位常常空着,增加底物会增加碰撞,速率上升。浓度高时,每个活性部位一空出就立刻被占据;酶达到饱和,以最大速率工作。再增加底物也无法进一步提高速率,只有增加酶、从而增加活性部位,才能做到。

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